義翹神州  MCHOGSI-1L  SMM CHO-GSI CHO細胞無血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達系統(tǒng)

義翹神州 SMM CHO-GSI CHO細胞無血清培養(yǎng)基-常備現(xiàn)貨

北京義翹神州科技股份有限公司是一家從事生物試劑研發(fā)、生產、銷售并提供技術服務的生物科技公司。所有產品都是自主研發(fā)和生產的，主要業(yè)務包括重組蛋白、抗體、基因和培養(yǎng)基等產品，以及重組蛋白、抗體的開發(fā)和生物分析檢測等服務，同時也為制藥公司或生物技術公司提供單克隆抗體候選藥物的臨床前規(guī)模生產服務。義翹神州的產品能夠覆蓋生命科學研究的多個領域，為分子生物學、細胞生物學、免疫學、發(fā)育生物學、干細胞研究等基礎科研方向和創(chuàng)新藥物研發(fā)提供“一站式"生物試劑產品和技術服務。

義翹神州  MCHOGSI-1L  SuperNuclease核酸酶殘留檢測試劑盒  SMM CHO-GSI CHO細胞無血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達系統(tǒng)  1L，產品簡介：

產品品牌：義翹神州

產品貨號：MCHOGSI-1L

產品名稱：SuperNuclease核酸酶殘留檢測試劑盒  SMM CHO-GSI CHO細胞無血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達系統(tǒng)

產品規(guī)格：1L

義翹神州  MCHOGSI-1L  SuperNuclease核酸酶殘留檢測試劑盒  SMM CHO-GSI CHO細胞無血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達系統(tǒng)  1L，產品說明：

產品描述

SMM CHO-GSI 培養(yǎng)基主要是為提高CHO穩(wěn)定株的蛋白產量而開發(fā)的，無血清，無動物源成分的培養(yǎng)基。不含L-谷an酰an，使用時需加入4mM的L-谷an酰an。不含HT。推薦用于CHO GS表達系統(tǒng)。

產品特點

蛋白表達量高，細胞生長好，嚴格的質控，批次穩(wěn)定性好。

產品用途

僅用于科學研究，不推薦用于人類或動物的診斷和治療。

儲存條件

2-8℃避光儲存12個月。

培養(yǎng)方法

（一）細胞復蘇

1.取出凍存管，迅速在37℃水浴鍋里融化，整個過程最好控制在1分鐘以內。

2. 輕輕地混勻細胞并全部移到50ml的離心管中，逐滴加入 5-8ml在37℃水浴鍋里預熱的新鮮培養(yǎng)基。 100g，5min離心細胞。

3. 倒掉上清，用10-20mL在37℃水浴鍋里預熱好的新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，放到100mL培養(yǎng)瓶中。 然后將細胞放到37℃，5%的CO2恒溫搖床中，110-175rpm培養(yǎng)。

4. 2-5天后取樣計數細胞密度和活率，如果細胞密度達到1.0X106cells/ml，則24進行正常傳代培養(yǎng)； 如果細胞密度低于1.0X106cells/m，則收集細胞進行離心處理，100g，5min。 然后重懸到20-30ml已經在37℃水浴鍋里孵育好的新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

5. 細胞生長正常后，傳代時起始密度控制在0.3X106cells/ml ，3-4天傳一次代。

注意事項：凍存管融化速度越快越好； 由于剛復蘇的細胞比較脆弱，所以整個過程要輕以免損傷細胞。

（二）細胞傳代

1. 取樣計數細胞，計算細胞密度。

2. 按照起始細胞密度0.3-0.4X106cells/ml，計算所需細胞懸液和培養(yǎng)基的用量傳代，100ml的培養(yǎng)瓶中放15-20ml培養(yǎng)（或250ml的培養(yǎng)瓶放50-60ml培養(yǎng)）。 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，5%CO2，搖床轉速：110-175rpm。

3. 每3-4天傳一次代，起始細胞密度傳到0.2-0.3X106細胞/ml。

如何使 CHO 穩(wěn)定的應變細胞適應 SMM CHO-SI 培養(yǎng)基：

通常情況下，細胞不經過馴化而能直接適應SMM CHO-GSI培養(yǎng)基，下面我們推薦2種方式來更換培養(yǎng)基：1）直接更換； 2）逐步更換。 首先選用的細胞要在對數生長期，同時細胞活率大于90%。

（三）直接更換

1. 細胞培養(yǎng)在加5-10%血清傳統(tǒng)的培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基里，直接稀釋傳代到SMM CHO-GSI培養(yǎng)基，細胞密度控制在0.3-0.4X106細胞/ml。

2.然后放入5%CO2、37℃的恒溫培養(yǎng)箱中，110-175rpm轉速條件下培養(yǎng)。

3. 3-5天后進行傳代或者換液

4. 繼續(xù)傳代培養(yǎng)，起始細胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml，直到wan全適應SMM CHO-GSI培養(yǎng)基。

5. 經過幾代在100%的 SMM CHO-GSI培養(yǎng)基中培養(yǎng)，傳代后4-6天細胞的密度可以達到2-3X106cells/ml，細胞活率大于90%。 這時說明細胞已經wan全適應SMM CHO-GSI培養(yǎng)基。 注意: 如果直接更換沒有成功，則進行逐步更換的方法養(yǎng)基。

注意: 如果直接更換沒有成功，則進行逐步更換的方法

（四）逐步更換

1.細胞培養(yǎng)在加5-10%血清傳統(tǒng)的培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基里，稀釋傳代，細胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml，原培養(yǎng)基與SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例為75：25。

2.然后放入5%CO2、37℃的恒溫培養(yǎng)箱中，110-175rpm。

3. 3-5天后進行傳代，如果細胞生長正常，則傳代時原培養(yǎng)基與SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例為50:50. 細胞密度仍控制在0.3-0.4X106細胞/ml。

重復步驟3，逐漸增加SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例（25：75;原始培養(yǎng)基與SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例為10：90），直到SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的100%。

5.在100%的SMM CHO-GSI培養(yǎng)基中，傳代后4-6天細胞的密度可以達到2-3X106cells/ml，細胞活率大于90%。這時說明細胞已經wan全適應SMM CHO-GSI培養(yǎng)基。

（五）凍存細胞

凍存細胞時CHO cells 要處在對數生長期同時細胞活率在90%以上。

1.取樣計數細胞，根據凍存管數計算所用細胞懸液體積和凍存液的體積，比例如下：92.5%的培養(yǎng)基混合物（50% 的新鮮SMM CHO-GSI培養(yǎng)基+50% 條件SMM CHO-GSI培養(yǎng)基 ）+ 7.5% DMSO，最終的細胞數為 5 x 106cells/ 管。

2.準備相應體積的凍存培養(yǎng)基：46.25% 的新鮮SMM CHO-GSI培養(yǎng)基 + 7.5% DMSO，放在4°C 備用。 凍存培養(yǎng)基最好為當天配制。

3.通過100g，5-10min離心收集細胞，留46.25%條件培養(yǎng)基重懸細胞，然后逐滴加入事先準備好的放4°C 的凍存培養(yǎng)基。

4.混合均勻后分裝細胞到凍存管中，一般2ml的凍存管放1-1.5ml，貼好標簽。

5.然后放到凍存盒中，放入-80°C 冰箱(每分鐘下降1°C)。

6.80℃冰箱中過夜放置（至少放置24小時），轉移細胞到液氮罐中，推薦儲存條件在-125°C to -200°C。

義翹神州 SMM CHO-GSI CHO細胞無血清培養(yǎng)基-常備現(xiàn)貨 

產品訂購信息：

MCHOGSI-1L  SuperNuclease核酸酶殘留檢測試劑盒  SMM CHO-GSI CHO細胞無血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達系統(tǒng)  1L